DNA

同源臂引物上下游退火温度在PCR实验中扮演着至关重要的角色。很多实验室研究员在进行实验设计时，往往会忽视引物的退火温度，而这直接影响到引物的结合效率和特异性，进而影响PCR的成功与否。退火温度的设定通常是基于引物的熔解温度（Tm），而Tm又与引物的长度、GC含量等因素密切相关。引物的上下游退火温度需要保持一致，以确保在PCR循环中，所有引物都能有效地结合到模板DNA上。如果上下游引物的退火温度差异