4T1乳腺癌细胞三维培养体系构建与转移模型优化
admin 19 2025-04-06 13:51:08 编辑
细胞名称：小鼠乳腺癌细胞细胞简称：4T1产品货号：TCM-C705种属来源：小鼠组织来源：乳腺细胞形态：上皮细胞样生长特性：贴壁生长培养体系：RPMI-1640+10%FBS+1%P/S传代比例：1:3-1:6，每2-3天换液一次传代周期：48-72 h培养条件：气相：95%空气+5%CO2，温度：37℃4T1细胞培养注意要点1. 小鼠乳腺癌细胞（4T1）细胞特性
① 小鼠乳腺癌细胞（4T1）为贴壁细胞，上皮细胞样，细胞在低密度时及传代第二天会有少量细胞为圆形或没有上皮细胞形态的细胞，期间不要换液，一般传代48h后会恢复正常。
② 4T1传代周期较短，在标准培养体系RPMI-1640+10%FBS中，倍增时间在24h左右，细胞传代比例1:6-1:8，传代周期2-3天。2. 小鼠乳腺癌细胞（4T1）注意事项① 4T1细胞密度越高消化时间越长，建议细胞密度80%进行传代，消化时间约5-10min。（不同品牌、不同温度的胰酶可能消化时间有区别）
② 4T1细胞在密度高于80%，或者在同一个培养器皿中培养时间过长，会导致细胞难消化，推荐使用分步消化的方式进行。4T1细胞推荐消化步骤：a. 去除细胞上清，使用0.25%胰酶替代PBS清洗一遍；
b. 加入适量胰酶，放入37℃培养箱消化，5min左右取出观察一次；
c. 如观察到有大部分细胞变圆，可轻拍瓶身，如细胞不可脱落则延长消化时间。
d. 如观察到有部分细胞脱落，则将已经脱落的细胞悬液收集到离心管中加入完全培养基中止消化，原瓶中再次加入新鲜胰酶重复消化一次。
e. 将分次消化的细胞悬液集中在一起进行离心，去除上清后按照1：6-1：8的比例进行分瓶。
f. 传代后第二天细胞不需要换液处理，一般2-3天即可长满。③ 血清质量差异可能引起倍增时间波动，建议选用高质量的胎牛血清。推荐使用4T1细胞专用培养基（TCM-G705）。
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